广西师范大学学报（自然科学版） ›› 2020, Vol. 38 ›› Issue (3): 85-91.doi: 10.16088/j.issn.1001-6600.2020.03.011

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HPLC同时测定广地龙中5种核苷类成分含量

关水清1, 周改莲1,2,3*, 董婧婧3, 林青华1, 黄盼1, 王倩1   

  1. 1.广西中医药大学药学院,广西南宁530001;
    2.中山大学生命科学学院,广东广州510275;
    3.康美药业股份有限公司,广东深圳518049
  • 收稿日期:2019-04-09 出版日期:2020-05-25 发布日期:2020-06-11
  • 通讯作者: * 周改莲(1983—),女,河南商水人,广西中医药大学副教授,博士。E-mail:zhgllhw@126.com
  • 基金资助:
    广东省科技计划(2017B090901016);广西中医药大学重点项目(2018ZD001);广西中医药大学研究生创新计划重点项目(YCSZ2018016);广西中医药大学大学生创新计划区级重点项目(201810600041)

Simultaneous Determination of Five Nucleosides in Pheretima aspergillum (E. Perrier) by HPLC

GUAN Shuiqing1, ZHOU Gailian1,2,3*, DONG Jingjing3, LIN Qinghua1, HUANG Pan1, WANG Qian1   

  1. 1. College of Pharmacy, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning Guangxi 530001, China;
    2. College of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou Guangdong 510275, China;
    3. Kangmei Pharmaceutical Co. Ltd, Shenzhen Guangdong 518049, China
  • Received:2019-04-09 Online:2020-05-25 Published:2020-06-11

PDF (PC)

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摘要： 建立同时测定广地龙中5种核苷类成分含量的HPLC法。采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(5∶95,体积比)等度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30 ℃,测定了广地龙药材中5种核苷类成分的含量。结果表明:尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷分别在14.84～111.30 ng(r=0.999 9)、126.00～945.00 ng(r=0.999 8)、63.60～477.00 ng(r=0.999 9)、612.00～4 590.00 ng(r=0.999 8)、41.60～312.00 ng(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为99.27%、99.14%、98.59%、98.69%、99.91%,RSD(n=9)分别为0.95%、0.86%、1.01%、0.86%、1.91%;20批广地龙中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷含量分别为 0.051 0~0.111 0、0.243 1~0.943 6、0.171 9~0.508 0、1.559 6~3.861 1、0.165 5~0.250 1 mg/g,5种总核苷含量为3.309 9~4.565 9 mg/g。该方法简便、可靠、重复性好、精密度高,可用于同时测定广地龙中5种核苷类成分的含量。

关键词: 广地龙, 核苷类, 含量测定, HPLC

Abstract: To establish an HPLC method for the quantitative of five nucleoside components in Pheretima aspergillum (E. Perrier).The mobile phase was eluted with Diamonsil C18 (250 mm× 4.6 mm, 5 μm) by using methanol-water solution (5∶95) such as mobile phase with a flow rate of 1.0 mL/min and a detection wavelength of 254 nm. The column temperature was 30 ℃. The contents of 5 nucleoside components in P. aspergillum (E. Perrier) were determined. Uracil, hypoxanthine, uridine, inosine and guanosine showed a good linear relationship in the range of 14.84～111.30 ng (r=0.999 9), 126.00～945.00 ng (r=0.999 8), 63.60～477.00 ng (r=0.999 9), 612.00～4 590.00 ng (r=0.999 8) and 41.60～312.00 ng (r=0.999 9), with average recovery (n=9) of 99.27%, 99.14%, 98.59%, 98.69% and 99.91%, respectively. The RSD(n=9)was 0.95%, 0.86%, 1.01%, 0.86% and 1.91%, respectively. The contents of uracil, hypoxanthine, uridine, inosine and guanosine in 20 batches were 0.051 0~0.111 0, 0.243 1~0.943 6, 0.171 9~0.508 0, 1.559 6~3.861 1 and 0.165 5~0.250 1 mg/g, respectively. The content of 5 nucleosides was 3.309 9~4.565 9 mg/g. The established method was simple, reliable, reproducible and accurate, and can be used for the simultaneous determination of 5 nucleosides in P. aspergillum (E. Perrier).

Key words: Pheretima aspergillum (E. Perrier), nucleoside and mucleobase, content determination, HPLC

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