广西师范大学学报（自然科学版） ›› 2020, Vol. 38 ›› Issue (3): 85-91.doi: 10.16088/j.issn.1001-6600.2020.03.011

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HPLC同时测定广地龙中5种核苷类成分含量

关水清1, 周改莲1,2,3*, 董婧婧3, 林青华1, 黄盼1, 王倩1   

  1. 1.广西中医药大学药学院,广西南宁530001;
    2.中山大学生命科学学院,广东广州510275;
    3.康美药业股份有限公司,广东深圳518049
  • 收稿日期:2019-04-09 出版日期:2020-05-25 发布日期:2020-06-11
  • 通讯作者: * 周改莲(1983—),女,河南商水人,广西中医药大学副教授,博士。E-mail:zhgllhw@126.com
  • 基金资助:
    广东省科技计划(2017B090901016);广西中医药大学重点项目(2018ZD001);广西中医药大学研究生创新计划重点项目(YCSZ2018016);广西中医药大学大学生创新计划区级重点项目(201810600041)

Simultaneous Determination of Five Nucleosides in Pheretima aspergillum (E. Perrier) by HPLC

GUAN Shuiqing1, ZHOU Gailian1,2,3*, DONG Jingjing3, LIN Qinghua1, HUANG Pan1, WANG Qian1   

  1. 1. College of Pharmacy, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning Guangxi 530001, China;
    2. College of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou Guangdong 510275, China;
    3. Kangmei Pharmaceutical Co. Ltd, Shenzhen Guangdong 518049, China
  • Received:2019-04-09 Online:2020-05-25 Published:2020-06-11

PDF (PC)

65

摘要： 建立同时测定广地龙中5种核苷类成分含量的HPLC法。采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(5∶95,体积比)等度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30 ℃,测定了广地龙药材中5种核苷类成分的含量。结果表明:尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷分别在14.84～111.30 ng(r=0.999 9)、126.00～945.00 ng(r=0.999 8)、63.60～477.00 ng(r=0.999 9)、612.00～4 590.00 ng(r=0.999 8)、41.60～312.00 ng(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为99.27%、99.14%、98.59%、98.69%、99.91%,RSD(n=9)分别为0.95%、0.86%、1.01%、0.86%、1.91%;20批广地龙中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷含量分别为 0.051 0~0.111 0、0.243 1~0.943 6、0.171 9~0.508 0、1.559 6~3.861 1、0.165 5~0.250 1 mg/g,5种总核苷含量为3.309 9~4.565 9 mg/g。该方法简便、可靠、重复性好、精密度高,可用于同时测定广地龙中5种核苷类成分的含量。

关键词: 广地龙, 核苷类, 含量测定, HPLC

Abstract: To establish an HPLC method for the quantitative of five nucleoside components in Pheretima aspergillum (E. Perrier).The mobile phase was eluted with Diamonsil C18 (250 mm× 4.6 mm, 5 μm) by using methanol-water solution (5∶95) such as mobile phase with a flow rate of 1.0 mL/min and a detection wavelength of 254 nm. The column temperature was 30 ℃. The contents of 5 nucleoside components in P. aspergillum (E. Perrier) were determined. Uracil, hypoxanthine, uridine, inosine and guanosine showed a good linear relationship in the range of 14.84～111.30 ng (r=0.999 9), 126.00～945.00 ng (r=0.999 8), 63.60～477.00 ng (r=0.999 9), 612.00～4 590.00 ng (r=0.999 8) and 41.60～312.00 ng (r=0.999 9), with average recovery (n=9) of 99.27%, 99.14%, 98.59%, 98.69% and 99.91%, respectively. The RSD(n=9)was 0.95%, 0.86%, 1.01%, 0.86% and 1.91%, respectively. The contents of uracil, hypoxanthine, uridine, inosine and guanosine in 20 batches were 0.051 0~0.111 0, 0.243 1~0.943 6, 0.171 9~0.508 0, 1.559 6~3.861 1 and 0.165 5~0.250 1 mg/g, respectively. The content of 5 nucleosides was 3.309 9~4.565 9 mg/g. The established method was simple, reliable, reproducible and accurate, and can be used for the simultaneous determination of 5 nucleosides in P. aspergillum (E. Perrier).

Key words: Pheretima aspergillum (E. Perrier), nucleoside and mucleobase, content determination, HPLC

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  • R284.1
[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典:一部[S]. 北京: 中国医药科技出版社,2015: 277.
[2] 三国·吴普. 神农本草经:卷三[M]. 北京: 人民卫生出版社, 1963: 123.
[3] 马安荣, 董晓莉. 自拟地龙平喘汤治疗哮喘证62例临床观察[J]. 中医临床研究,2018,10(17): 109-110.
[4] 吴军豪, 江建春, 闻国伟,等. 复方地龙片治疗椎动脉型颈椎病60例临床观察[J]. 临床医药文献电子杂志, 2019, 6(39): 8-9.
[5] 汤兴萍. 地龙消痫汤联合卡马西平治疗小儿癫痫26例[J]. 中国中医药科技, 2019, 26(2): 267-269.
[6] 孙洁, 魏劭恒, 毛润乾, 等. 广地龙古今入药品种对比研究[J]. 中药材, 2018,41(6): 1312-1316.
[7] 黄庆,李志武,马志国,等. 地龙的研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志,2018,24(13): 220-226.
[8] 魏银贵,李建,程培秀. 掺伪地龙的质量分析[J]. 中国中医药现代远程教育,2013,11(17): 160-161.
[9] 李鑫禹,索绪斌,张涵. 地龙药物质量的研究现状及展望[J]. 黑龙江中医药,2014,43(5): 70-72.
[10]季倩,张汉明,陈维荣,等. 从地龙研究看如何破解中药资源与品质困局[J]. 世界科学技术-中医药现代化,2014,16(11): 2308-2313.
[11]刘巧,毕启瑞,谭宁华,等. 地龙蛋白多肽类成分的研究进展[J]. 中草药,2019,50(1): 252-261.
[12]黄敬文,宏伟,段剑飞. 地龙的化学成分和药理作用研究进展[J]. 中医药导报,2018,24(12): 104-107.
[13]王春玲. 中药地龙的活性成分与药理作用研究[J]. 亚太传统医药,2015,11(7): 53-54.
[14]张晓晨. 地龙药理与临床研究进展[J]. 中成药,2011,3(9): 1574-1578.
[15]SUBARAJA M, VANISREE A J. Counter effects of Asiaticosids-D through putative neurotransmission on rotenone induced cerebral ganglionic injury in Lumbricus terrestris[J]. IBRO Reports, 2019, 6:160-175.
[16]丁兴杰,熊亮,周勤梅,等. 天然核苷类成分的化学结构和药理活性研究进展[J]. 成都中医药大学学报,2018,41(2): 102-108.
[17]张雪梅,杨丰庆,夏之宁. 食品中核苷类成分的药理作用研究进展[J]. 食品科学,2012,33(9): 277-282.
[18]谭玲龙,钟凌云. 地龙的炮制研究进展[J]. 江西中医药,2017,48(10): 75-77,80.
[19]贺葵邦,王英姿,张春泥,等. 正交试验优选地龙水提取工艺[J]. 中国实验方剂学杂志,2013,19(6): 33-35.
[20]李婷,杨骏,张彤. 多指标综合评分法优选地龙水提纯化工艺[J]. 中国新药杂志,2016,25(19): 2255-2261.
[21]曹文杰. HPLC法测定复方地龙胶囊中尿嘧啶、次黄嘌呤和肌苷的含量[J]. 北方药学,2015,12(9): 5-6.
[22]李坚,龙晓英,何琳,等. HPLC测定不同产地广地龙中次黄嘌呤的含量[J]. 中药材,2006(5): 448-449.
[23]吴文如,李薇,赖小平. HPLC法测定不同产地地龙中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷的含量[J]. 中国药师,2011,14(7): 914-917.
[24]季倩,高守红,张汉明,等. HPLC法测定各沪产地龙和广地龙中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶和尿苷的含量[J]. 第二军医大学学报,2015,36(4): 443-446.
[25]周恒,曹依敏,苗水,等. HPLC法测定沪地龙中7个核苷类成分的含量[J]. 药物分析杂志,2018,38(1): 97-103.
[26]丘琴,庾丽峰,陈明伟,等. HPLC法测定凹叶景天茎叶中槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量[J]. 广西师范大学学报(自然科学版),2018,36(2): 98-104.
[27]赵英,刘小翠,廖志明,等. HPLC同时测定四数獐牙菜中3种有效成分含量[J]. 广西师范大学学报(自然科学版),2016,34(1): 118-121.
[28]陈如意,罗培,李怡杰,等. HPLC测定四方藤中3种岩白菜素类化合物的含量[J]. 广西师范大学学报(自然科学版),2015,33(1): 99-103.
[1] 黄四新,周先丽,牟俊飞,罗琴,黄晓,陈旭,梁成钦. 罗汉果甜苷ⅡA的分离鉴定含量测定及其降糖抗氧化活性研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2019, 37(3): 132-141.
[2] 蒋向辉, 蒋天智, 王翔, 苑静. 青钱柳叶多糖中单糖组分分析[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2018, 36(2): 87-93.
[3] 丘琴,庾丽峰,陈明伟,甄丹丹,黄丽锦,甄汉深,许玉华. HPLC法测定凹叶景天茎叶中槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2018, 36(2): 98-104.
[4] 吴竹, 田漫漫, 谭琪明, 陈震, 王秋萍, 何珺. HPLC-RID测定银蓝通络口服液中银杏内酯含量[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2017, 35(2): 87-92.
[5] 白雪, 曾擎屹, 朱奎德, 卢永昌. CZE法测定白花龙胆6种活性成分含量研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2016, 34(1): 122-127.
[6] 李建军, 贾国伦, 王君, 梁建强, 杨丽. 金银花不同种质花蕾的形态和品质成分比较分析[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2013, 31(4): 103-108.
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[1] 唐国吉,赵婷,何登旭. 扰动广义混合变分不等式的可解性[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2018, 36(1): 76 -83 .
[2] 梁艳,周德雄,薛佳津,刘晓波,李俊,杨瑞云. 中药血散薯中非生物碱类化学成分研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2018, 36(1): 95 -98 .
[3] 陈锦, 罗晓曙. 一种新的基于小波变换的QPSK信号解调方法[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2016, 34(2): 35 -45 .
[4] 许伦辉, 刘景柠, 朱群强, 王晴, 谢岩, 索圣超. 自动引导车路径偏差的控制研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 1 -6 .
[5] 邝先验, 吴赟, 曹韦华, 吴银凤. 城市混合非机动车流的元胞自动机仿真模型[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 7 -14 .
[6] 肖瑞杰, 刘野, 修晓明, 孔令江. 耦合腔光机械系统中两个机械振子的态交换[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 15 -19 .
[7] 黄慧琼, 覃运梅. 考虑驾驶员性格特性的超车模型研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 20 -26 .
[8] 袁乐平, 孙瑞山. 飞行冲突调配概率安全评估方法研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 27 -31 .
[9] 杨盼盼, 祝龙记, 操孟杰. 基于STM32的TSC型无功补偿控制系统的研究[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 32 -37 .
[10] 章美月. 关于电子束聚焦系统模型的一些新结果[J]. 广西师范大学学报（自然科学版）, 2015, 33(1): 38 -44 .
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